谷氨酸(Glu)檢測試劑盒（比色法）檢測原理！

產品說明：
Glu 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，不僅是組成蛋白質的 20 種氨基酸之一，而
且通過轉氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內主要氨基來源之一。此外，Glu 還是味精的主
要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生物試劑。
 

谷氨酸脫氫酶（GDH）催化谷氨酸和 NAD 生成α-酮戊二酸、NADH 和 NH4+，引起 340nm 處吸
光度的上升，通過測定 340nm 吸光度的變化，計算谷氨酸含量。

需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
 

操作步驟：
一、谷氨酸提取
細菌、細胞或組織樣品：收集細胞或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照每 500 萬細菌或細
胞加入 1mL 試劑一，超聲波破碎細菌或細胞（功率 20％，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次），10000rpm，常溫離心 10min，取上清待測。稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一進行冰浴勻漿，10000 rpm，常溫離心 10min，取上清待測。

谷氨酸含量計算

1、標準曲線的繪制：
以谷氨酸含量（µmol/mL）為 x 軸，標準管?A 為 y 軸，繪制標準曲線 y=kx+b。將測定管?A 帶
入方程得到 x 值。
2、氨基酸含量計算：
（1）按照蛋白濃度計算
谷氨酸含量（µmol/mg prot）=x×V 樣本÷（Cpr×V 樣本）=x÷Cpr。
（2）按照樣本鮮重計算
谷氨酸含量（µmol/g 鮮重）=x×V 樣本÷（W÷V 樣總×V 樣本）=x÷W。
（3）按照細菌或細胞數量計算
谷氨酸含量（μmol/10
4 cell）＝x×V 樣本÷（500÷V 樣總×V 樣本）=0.002x。
V 樣總：加入提取液體積，1mL；V 樣本：加入的樣本體積，0.2mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；
W：樣本鮮重，g；1000：細菌或細胞總數，1000 萬。
 

注意事項：
為提高檢測靈敏度，測定管的吸光值應小于 1 且?A 小于 0.4，若大于此值則需要將上清液用試
劑一稀釋至適當倍數后測定。

谷氨酸(Glu)檢測試劑盒（比色法）檢測原理！